馬Elisa試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面我們談?wù)劜僮髦懈鱾€(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法。
下面分析馬Elisa試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法
選擇馬Elisa試劑盒：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2加樣可能原因：）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))；
3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法：）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放-2小時(shí)后，再用3000rmp離心5分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒混合5-0次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心5分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2)加樣后及時(shí)放入孵箱。3)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。4)如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5)標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3孵育可能原因：)孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；2)孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法：)貼封片或加蓋；2)按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4洗板可能原因：)采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。2)采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。3)反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：)保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；2)合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5顯色可能原因：)顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；2)加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：)顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用；2)加樣時(shí)保持顯色劑不外流；3)A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。6終止可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。7讀板如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸;盡可能實(shí)現(xiàn)馬Elisa試劑盒檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
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更新時(shí)間：2022-10-28 
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